大三進實驗室：進實驗室能學到什麼？

基本上我在廖志中老師實驗室（海洋化學生物學實驗室）就單純學習技術與其原理，和幫忙學姊做一些實驗，沒有接任何計畫。因此以下內容不涉及任何機密與配方，而我會聚焦在我在實驗室所學到的技術與細節。

沒接計畫反而自在多了，不用處理行政事務且沒有進度壓力，實驗進度都是自己自訂的。最後，如果想要離開實驗室，也能一身輕就走，無須被綁死。

在這裡我先說結論，進實驗室能學到什麼？對我來說，看不見的、無法被複製的、特殊的才是最有價值的，而看得見的、能夠被複製的都是附加的價值。以下介紹的技術乃是顯而易見的成果，也是顯著就能看見進步的，甚至是可以直接轉換成金錢來衡量的。但也很容易被他人複製，因此當更多人都能學會這些技術時，其價值就會相對下降。

而所謂看不見的價值，像是：人際關係、觀察、執行、規劃、性格、心情、體驗、……等等，當然這部分有些人認同其價值，有些人不認同其價值。但最重要的是，這些能夠被我稱為有價值之物，都是因為難以被複製且個人的。

所以我能呈現的也只有能夠被我看見的，能夠被我掌握的，能夠被我述說的這些附加價值。因而以下都只是冰山一角的價值，真正的價值，必須由各位自行去掌握與創造。而我只是一位說書人，說著我的所見所聞。

三、所學技術

三大實驗與其細節和所花時間

一學期18週，我在實驗室所花時間至少約70hr，平均一週4hr。一般老師會希望每週能來兩次，一次3hr。所以我所花的時間是偏少的，不過還是要看老師的要求是什麼？我所經手的實驗分成三大項：(1)製備培養基；(2)抑菌實驗；(3)萃取芒果皮。以下是各個實驗的流程：

（一）製備培養基 (MA, MP, PDA)

取血清瓶並依序加入等比例的培養基配方，再加入agar均勻攪拌並調整其酸鹼值。至入高壓滅菌釜中，將之加熱並滅菌。取之並放置室外等其溫度降低，直到手能拿取瓶身之溫度。在無菌操作台中，將培養基溶液到至培養皿中，放置室溫直到凝結。用塑膠套套入培養皿堆中，並將之倒立冷藏。

（二）抑菌實驗

四種海洋生物樣品

1. 培養細菌：

將器具高溫高壓滅菌並將樣品切碎至研缽中，在無菌操作台中，用杵將之搗碎直到流出液體。準備數根無菌海水試管，以連續稀釋十倍的方式將之稀釋到10^-3倍。將10^0, 10^-1, 10^-2, 10^-3滴入培養基中並以三角環均勻抹平至乾燥並在二重複一次。最後將塗盤放置25℃培養箱中培養數天直到長出菌落。

篩菌實驗

2. 四區劃分

將塗盤上選出幾株不同的菌落並依序標號，再用高溫殺菌過的接種環將菌落挑起並畫一區數條折線在培養基上，接種環滅菌再畫一區，直到畫到第四區為止。最後，將培養皿外圍纏上膠帶並將之倒放，再放入25℃培養箱中培養數天直到長出菌落。

DSI-Y002-15, 16, 27 對Candida有抑製效果

3. 轉養

準備數根無菌海水試管，在無菌操作台中，使用滅菌過的接種環將菌落挑起並至入無菌海水中，將其攪拌均勻。最後將轉養好的試管，放入37℃培養箱中培養並長時間均勻晃動，直到細菌均勻布滿於無菌海水中。然而，致病菌的培養需使用液態培養基將之轉養並放置37℃培養箱中。

4. 抑菌實驗

取20mL MA將其劃出方格並標號，再使用滅菌過棉花棒取致病菌塗佈於MA上，並使用1000μL pipet槍頭在方格中挖出圓槽。再取100μL 菌液至入凹槽中並二重複實驗，最後放入37℃培養箱中培養並長時間均勻晃動，直到菌液乾掉，並觀察其是否有抑菌圈。

（三）萃取芒果皮

芒果皮初萃產物

將芒果皮浸至於甲醇溶劑中，並用震盪機加速萃取。直到萃取液呈黃色時，即可用減壓過濾裝置將萃取液與芒果皮分離。將過濾好的濾液裝至圓底瓶中，並使用減壓濃縮機將之濃縮成深色黏稠液體。取樣品瓶清洗並秤其瓶重，再使用滴管將濃縮液滴入樣品瓶中。過程中，可以使用震盪機與甲醇，將附著於杯壁上的濃縮物質洗下來並裝入樣品瓶中。將裝好濃縮液的樣品瓶使用吹氮濃縮器做進一步的濃縮，並秤其重，求得萃取物重。
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